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      碳13、碳14、內鏡檢查……一文了解最全幽門螺桿菌檢測

      2020-12-08 00:00:04醫學界
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      幽門螺桿菌(Hp)是一種革蘭染色陰性螺旋狀細菌,主要通過糞-口傳播、口-口傳播、胃-口傳播以及醫源性傳播。Hp感染是慢性胃炎最主要的病因,《第五次全國幽門螺桿菌感染處理共識》提出,Hp感染是一種感染性疾病,幾乎所有的Hp感染患者均有慢性活動性胃炎。Hp感染者中,約15%~20%發生消化性潰瘍,5%~10%發生Hp相關消化不良,約1%發生胃癌和胃黏膜相關淋巴組織(MALT)淋巴瘤。

      據統計,目前我國Hp感染率約50%,幾乎是兩個人中就有一個!自1983年Hp被發現以來,檢測該細菌的方法也不斷出現,但每種方法都存在著其各自的優缺點和臨床應用的限制。很多患者接受了多次不同的Hp檢測,并對一些可能矛盾的結果一頭霧水,這就需要大家了解關于Hp的常用檢測方法及其優勢、弊端。

      幽門螺桿菌的常見檢測方法

      臨床常用的Hp檢測方法可以分為侵入性和非侵入性兩大類。侵入性試驗包括內鏡檢查、組織學檢查、快速尿素酶試驗(RUT)、細菌培養和以PCR為代表的分子生物學檢測。非侵入性試驗則包括尿素呼氣試驗(UBT)、糞便Hp抗原檢測(SAT)、Hp血清學檢測和分子生物學檢測。

      侵入性檢測需要通過胃鏡取得活檢標本后再對標本進行檢測,其缺點是有一定創傷性,結果會受到活檢部位的影響;但是可以同時明確有無胃癌、消化性潰瘍、胃炎等重要疾病。

      非侵入性檢測無需經胃鏡活檢,是無創傷性且使用方便的檢測方法,同時也避免了活檢部位對結果的影響。

      1 內鏡檢查

      內鏡檢查對消化系統疾病的診斷有重要作用,內鏡檢查可作為以消化不良癥狀為主訴的亞洲人群的初始診療項目。

      內鏡檢查可提供胃黏膜精確、清晰的圖像,也可經此途徑獲得胃活組織標本,用于其他侵入性方法的進一步研究。但不同內鏡技術結合不同的分型方法,診斷的準確率、靈敏度、特異度差異較大,而且內鏡檢查過程耗時,易使患者感到不適,且要求操作人員有一定的技術和經驗。

      2 快速尿素酶試驗(RUT)

      若胃活組織標本被取出,RUT被推薦為診斷Hp感染的首選方法。

      RUT基于Hp脲酶活性,活組織標本中存在的Hp可將測試紙中的尿素轉化為氨,使pH檢測儀中pH升高并出現顏色變化。RUT可獲得較好的診斷效果,診斷的靈敏度為85%~100%, 特異度接近100%。

      對于常規臨床實踐,RUT是診斷Hp最有用的侵入性方法,其具有便宜、快速、易于操作及高特異性。

      但RUT存在可能導致假陰性的結果,活檢標本受細菌密度、H2受體拮抗劑、質子泵抑制劑、鉍劑、抗菌藥物、胃酸缺乏和出血等因素的影響,這些都增加了假陰性結果的可能性。而且,對尿素酶試驗在兒童Hp檢測中的應用的敏感性仍存在爭論。

      3 組織學檢查

      組織學檢查有助于深入了解胃黏膜狀況。組織學方法除檢測Hp外,還提供了有關胃炎類型、胃黏膜萎縮、腸化生、惡性腫瘤等病變并發癥的信息。

      有研究報道,消化性潰瘍患者不管是否出血,相比細菌培養、血清學和快速尿激酶試驗,組織學檢查最準確。

      但該方法獲得結果時間較長,成本較高,依賴于胃鏡操作者及病理學家的技術和經驗,而且影響組織學診斷準確性的因素也很多,如取組織部位、大小和數目,染色方法,是否應用質子泵抑制劑、抗菌藥物,以及病理學檢測人員的經驗等。

      4 細菌培養

      細菌培養在胃活組織標本中進行,主要用于科學研究,不是Hp檢測的常規方法。

      除細菌低負荷、飲酒、胃出血、質子泵抑制劑、H2受體拮抗劑及抗生素的應用外,樣本質量、運輸條件及時間、有氧環境的暴露和微生物學家的技術和經驗都會影響結果的準確性。

      細菌培養是耗時、昂貴、復雜、受影響因素較多的檢測,但細菌培養可提供Hp對抗生素的敏感性結果,也可分離出Hp進一步分析表型和基因型特征,為Hp的精準治療提供信息。

      5 尿素呼氣試驗(UBT)

      UBT被認為是非侵入性方法中Hp診斷的金標準。

      UBT已經使用了近30 年,仍然是診斷Hp感染的最流行的無創方法,亦可用于流行病學的研究及根除治療有效性的評估。目前,臨床常用的13C-UBT和14C-UBT在診斷準確性上并無差異(還想了解更多關于UBT的知識?快戳鏈接“檢測幽門螺桿菌,到底選碳13還是碳14?”)。

      為避免假陰性結果的產生,患者需要在試驗前2周停用質子泵抑制劑或在試驗前4周停用抗菌藥物。這是因為這些藥物的使用會造成UBT的假陰性結果,而胃中其他產尿素酶的病原體的存在也會導致假陽性結果的產生。

      UBT對于胃部分切除的Hp感染患者診斷不佳的原因可能是尿素沒能充分與尿素酶發生反應。此外,該方法有一定放射性,部分人群使用受限。

      6 糞便Hp抗原檢測(SAT)

      SAT是一種無創、方便、價廉、易實施的檢測方法,可用于Hp根除治療的療效評估, 也可用于流行病學研究及臨床篩查。

      SAT的原理是定植于胃黏膜上皮細胞表面的幽門螺桿菌代謝產物和死亡菌體崩解產物隨上皮細胞更新脫落,這些抗原成分可抵御消化酶的降解出現在糞便中,抗原與檢測試劑中的抗體形成抗原抗體復合物,使底物變色,從而判斷是否感染。

      SAT有酶免疫測定法和免疫層析法兩種方法,應用單克隆或多克隆兩種抗體。一般而言,基于單克隆抗體的測試比基于多克隆抗體的測試更準確,基于酶免疫測定法的測試比基于免疫層析法的測試結果更可靠。

      SAT的準確性受質子泵抑制劑、抗生素和N-乙酰半胱氨酸等抑菌藥物以及出血性潰瘍的影響;糞便的儲存和運輸也會對診斷的準確性造成影響。

      7 血清學檢測

      血清學檢測是一項通過酶聯免疫吸附測定、酶免疫測定法或免疫印跡法檢測Hp抗體的方法,由于其具有廉價、快速、易于被患者接受的特點,被廣泛用于流行病學的調查。

      其他優點包括診斷準確性不受潰瘍出血、胃萎縮和抗菌藥物或質子泵抑制劑使用的影響,這些因素在其他的侵入性或非侵入性試驗中會導致假陰性結果的產生。

      血清學試驗由于其抗體效價在根治成功后仍能維持很長時間,故無法區分過去和現在的Hp感染,不能用于根除療效評估。

      8 聚合酶鏈式反應(PCR)

      PCR被廣泛地用于檢測來自胃組織、糞便、胃分泌物以及其他樣本中的Hp,其檢測樣本可來源于侵入性及非侵入性檢查。

      相比其他常規的檢測方法,PCR擁有著超過95%的特異性和敏感性,并在檢測消化道出血患者的Hp時能得出更準確的結果。

      PCR的其他優點包括樣本中需要的原始菌量少、檢測快速、無需特殊處理或轉運流程,能幫助臨床醫生在診療時作出更快、更準確的判斷。

      此外,PCR也能同時對特定位點的耐藥基因[大環內酯類和喹諾酮類藥物(cagA、vacA)、克拉霉素(23S rRNA) 、喹諾酮類藥物(gyrA) 、 四環素(16S rRNA)、 利福平(rpoB)、 阿莫西林(pbp-1a)和甲硝噠唑(rdxA、 frxA、 frxA)等]的突變進行檢測。

      雖然PCR能更快速、更精確地檢測Hp及其耐藥菌株,但成本、試驗設備等都影響著PCR在臨床的應用。

      總結

      Hp與多種消化系統內外疾病有關,正確診斷Hp對相關疾病的預防及治療至關重要。Hp檢測方法分為侵入性和非侵入性。

      內鏡檢查受檢查者經驗影響,靈敏度和特異度差別較大,不作為常規選擇;RUT和UBT分別作為侵入性和非侵入性Hp檢測方法的首選,在臨床中應用較廣泛;細菌培養和PCR可用來檢測Hp對抗生素的耐藥性,有較高的科研價值,可制訂個體化除菌方案;UBT和SAT可用來評估Hp根除治療的有效性;血清學和PCR具有檢測結果不受質子泵抑制劑藥物影響的特點。

      綜上,Hp感染檢測可根據Hp流行地區的患病率、可行性,各種方法的優缺點及每例患者不同的臨床情況而選擇不同的方法。

      參考文獻:

      [1]崔俊華等.幽門螺桿菌檢測方法的發展與比較[J].檢驗醫學.2018, 33(1):82-87

      [2]王雪等.幽門螺桿菌感染診斷方法的研究進展[J].醫學綜述.2020,26(05),955-959+964

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